HEK293技術(shù)平臺
人胚胎腎(HEK)293細胞及其衍生細胞系,極少表達細胞外配體所需的內(nèi)生受體,且擁有較高的轉(zhuǎn)染效率,是研究和表達外源基因的重要工具。其在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白互作研究、病毒包裝、快速小規(guī)模蛋白表達以及生物藥物生產(chǎn)過程中均有廣泛的應(yīng)用。
QuaCell?提供一系列化學成分限定的HEK293懸浮培養(yǎng)基,用于HEK293的快速懸浮馴化、長期高密度培養(yǎng)、穩(wěn)轉(zhuǎn)及瞬轉(zhuǎn)表達。通用性培養(yǎng)體系可兼容包括293、293T、293FTM、293S、293SG、293SGGD在內(nèi)的所有HEK293細胞系。同時也能提供最專業(yè)的培養(yǎng)基個性化定制開發(fā)及工藝優(yōu)化放大服務(wù),使客戶能輕松利用HEK293平臺高效快速表達病毒顆?;蚧钚缘鞍住?br/>
描述
Wayne293? 瞬轉(zhuǎn)培養(yǎng)基是一款針對人類胚胎腎細胞293(HEK293)和其衍生細胞系瞬時化學轉(zhuǎn)染表達所研發(fā)的無血清、無動物成分培養(yǎng)基,適用于HEK293系列細胞的懸浮培養(yǎng)、化學轉(zhuǎn)染以及瞬時轉(zhuǎn)染。
流程
圖1. HEK293F細胞在Wayne293?、HEK293CD(Cat.#A21001)及市售商品培養(yǎng)基Medium F中做Batch培養(yǎng)的表現(xiàn)。125ml搖瓶,工作體積30ml,φ26mm,125rpm,濕度75%,CO2 5%,37℃ 培養(yǎng)7天。
圖2. 不同種類HEK293細胞(HEK293、HEK293T、HEK293FT、HEK293F)在Wayne293?中做Batch培養(yǎng)的表現(xiàn)。125ml搖瓶,工作體積30ml,φ26mm,125rpm,濕度75%,CO2 5%,37℃ 培養(yǎng)7天。
圖3. 將帶EGPF熒光標記基因的質(zhì)粒分別在Wayne293?和市售商品培養(yǎng)基Medium F中,轉(zhuǎn)染進入HEK293F細胞,轉(zhuǎn)染后按各自標準條件繼續(xù)培養(yǎng)24小時,將細胞置于熒光顯微鏡下觀察,結(jié)果如圖。
圖4. HEK293F細胞在Wayne293?及市售商品培養(yǎng)基Medium F、Medium A、Medium B中轉(zhuǎn)染后的生長及表達情況。按4中培養(yǎng)基各自的操作要求進行轉(zhuǎn)染及培養(yǎng)。125ml搖瓶,工作體積30ml,濕度75%,CO2 5%,37℃培養(yǎng)7天。
圖5. 不同反應(yīng)器(TPP、搖瓶、發(fā)酵罐)工作體積下,HEK293F細胞在Wayne293?中瞬轉(zhuǎn)表達同一單抗的產(chǎn)量對比。CO2 5%,37℃ ,轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)7天。隨著培養(yǎng)規(guī)模放大,產(chǎn)量波動可控制在合理范圍之內(nèi)。